結晶が塩か蛋白質かを見分ける

100512 S. Fushinobu

塩の結晶は外見からは蛋白質の結晶と見分けにくいです。塩の結晶だって偏光がある場合もありますし。

• X線を当てる
  • 確実！（でも、いつもできるとは限りませんよね）
• 針でつぶす
  • 判定法：塩の場合固い。パチッと音がするほどの手応えがある。蛋白質の場合はフニャフニャと崩れる
  • 利点：ほぼ確実に分かる、簡単
  • 欠点：破壊的、自分の手の感覚にしか結果が残らない
• Dyeで染める
  • Hampton ResearchからIzitという名前の試薬が売られている。安い試薬だが、メチレンブルーの水溶液なので自分でも作れる（作り方は"Prosil and Izit"とか"alternative to IZIT"とかで検索すればccp4bbのアーカイブがヒットする）
  • 判定法：結晶のあるドロップにちょぴっと（0.5〜1 μl程度）入れる。しばらく待つ。蛋白質だと青く染まるが塩だと染まらない。
  • 利点：簡単、他の人に結果を見せることができる
  • 欠点：あまりはっきり判定が出ない、時間がかかる、破壊的
• Melt test
  • 判定法：ハンギングドロップにつかうカバーグラスの上に結晶を乗せ、ブンゼンバーナーの炎の上を数回くぐらせるだけ。塩の場合は形が残るが、蛋白質の場合はぐじゃぐじゃになる。
  • 利点：簡単、dyeで染めた後にもできる
  • 欠点：顕微鏡のそばにバーナーが要る、破壊的
  • Raghunathan et al., Acta Cryst. F66 (5), 615-620 (2010) [doi] [Wiley]